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多肽的纯度(HPLC)及多肽含量(Peptide Content)有何差别？

多肽的纯度(HPLC)及多肽含量(Peptide Content)意义不同，订购多肽之前需要明确。

案例：1g 多肽  HPLC 99% 纯度， 80% 多肽含量，水含量10%，TFA含量10%

称重：1g

多肽部分：800mg  【其中792mg 是目的多肽(多肽部分的 99%)，8mg 是其他肽杂质 (多肽部分的 1%)】

水部分：100mg

盐部分： TFA 100mg

一般订购多肽纯度指标，指的是HPLC纯度。

具体解释：

多肽的纯度是指HPLC方法在220nm处检测到的目标多肽的含量(220nm是肽链的吸收波长)，紫外分光光度计检测不到水和残留的盐不。可发现其他的杂质包括：缺失序列(缺失了一个或多个氨基酸残基的靶序列)，截断序列(加帽过程中产生的序列)脱保护不完全序列(产生于整个合成过程或最后的裂解过程)。

多肽纯化不涉及水和盐。HPLC纯化会产生少量的TFA(三氟乙酸)，如：游离的氨基末端和其他侧链如Arg、Lys、His都可生成少量TFA杂质。通常交付的多肽多含有微量TFA和残留水。即使处于冻干状态，水也会因共价结合的能力不同而不同程度地存在着。

纯化前的多肽中包含的杂质包括多肽和非多肽物质, 纯化后的多肽中包含的杂质除了TFA盐，大多数为序列被修改的多肽。

     a.缺失了一个或多个氨基酸残基的靶序列

     b.为避免缺失序列的产生而进行的加帽操作，截断序列即产生于加帽过程中

     c. 产生于整个合成过程或最后的裂解过程

     d.保护基重新附着在多肽的其他位置  

如果对盐有特殊要求，请在询价时，明确一下(脱盐，转成醋酸盐 等)。如果不注明，做成的多肽都是TFA(三氟乙酸)盐形式。

注意，南京百富策划论坛生物科技有限公司使用的HPLC 测试体系如下：

Solvent  A: 0.1%Trifluoroacetic in 100% Acetonirile

Solvent  B: 0.1%Trifluoroacetic in 100% Water

Flow rate:1.0ml/min

Wavelength:220nm

色谱柱：C18 反相柱

如果您有特殊的分析条件(色谱条件)，请在订购之前告知，我们将和商讨。如果您没有特殊要求，我们的测试条件就是上述常用的体系。

多肽含量(Peptide Content)是指与非肽物质(主要为抗衡离子和水)相比的多肽量。可通过氨基酸分析来确定肽净含量。如果您需要这项服务请在订单上明确。